首先解释dithizon，因为不是单一染胰岛细胞，我以前也以为是只是染胰岛细胞，但是要是您的dithizon的浓度较高，其他细胞也会染成红色。故dithizon的浓度要适中。
您的胰腺分离方法很好，故您以自己的为主，因为其他人的都是自己经验，符合自己的方法。
移植到肾被膜下移植效果不理想请说出是为什么。
总体的印象是看不出什么问题。如果用我上面提到的东西肾被膜下注射胰岛细胞的话第一：塑料管比较软，不容易插入被膜下第二：由于管比较软，感觉插入后游离范围也不甚理想，推出后会有漏的嫌疑。一直保持联系的一位朋友说直接采用1mL注射器自带的针头来注射我也试过，插入比塑料管要容易，显微镜下操作熟练后也不会损伤肾实质。缺点就是由于1mL注射器自带针头不透明，看不到胰岛盼指点，看有没有更好的器材代替多谢。另外，DTZ好像有好多型号，不知clsun213您用的是哪一种可否告知。我得到的信息好像都是进口的，有没有国产的？盼望告知谢谢。
是比利时生产的，不知是否可以用？您的移植顺序没有听明白，应是先分离被膜留出空间后在伸进软管，故软管的硬度没有强调，并且用注射器直接插入被膜很危险，并且细胞出来时的移动应该监测得到故不应选用注射针头。
软管您能不能告诉我其直径多大？
dithizon是不管哪个厂家都可以，但是好像没有国产。Sigma也有。clsun213您好！感谢您的指点。我用的软管直径具体多少并没有测量，不过应该可以大过01mm。请问您是怎样先分离空间的，是用什么器材？这两天好像只有我们两个在讨论，感觉不太合适，我是否可PM给您，或者直接电话联系？您的经验确实很丰富，但感觉您每次只是点到为止，虽对于我这种低水平的有很大帮助，但有些问题却不能实质性解决，比如肾包膜下注射胰岛的问题，至今您没有很详细的解释？这也恐违背您最初发起此贴的初衷吧？我们是否可以进一步联系？期待有机会向您多多学习谢谢。胰岛细胞大家好，我正在做胰岛分离，王秀琴尚宏伟曾晓蓓孟庆峰王兴翠杨进摘要目的研究实验性脾虚证大鼠胰岛细胞胰岛素、胰岛淀粉样多肽、胰高血糖素和生长抑素分泌活动的变化，探讨中医我用的是SD乳鼠，取出胰腺后剪碎，用胶原酶消化，胰岛a细胞将产物用DTZ染色，在显微镜下看到的大团大团的黄染而不是红色的组织，也有少量的单个细胞样东西，我不知道单个细胞样的是不是包含AB，D细胞的一个胰岛细胞？一般文献上所说的胰岛细胞团是指包含AB，D细胞的一个胰岛细胞吗？而大团块是一个胰岛细胞团还是多个胰岛细胞团？胰岛B细胞能看得出吗？这样的大团块该如何计数，算几个细胞？
未命名我回来了
对于你的问题,我用我实验的一幅照片来回答,图中猩红色为胰岛,外面不着色的是外分泌组织(图片请勿使用)
缩略图，点击图片链接看原图学习中上海生工生物工程有限公司就有DTZ,很便宜的请教大家,在显微镜下手捡胰岛用什么工具?不用工具，就用100的pipet。随着细胞移植技术在临床治疗方面的迅速发展，COBE2991细胞分离机针对不同用途均有特定的配置。近年来随着胰岛细胞移植技术在欧美地区的逐渐成熟和临床应用的发展。COBE2991细胞分离机在胰岛细胞分离、纯化技术设计方面也有专门的设计和配置,包括相关条件的优化(离心条件、细胞分纯化、温度调节控制)以及专用的分离密度梯度系统和管理吸附收集系统
通过新的配置使COBE2991细胞分离机能够特异性地对胰岛细胞进行分离纯化国外应用该机开展胰岛细胞移植的使用已达5年,并取得了极为满意的临床疗效目前,全球开展胰岛移植技术主要的20多家医院均使用COBE2991细胞分离机作为关键设备，其中北美约占2/3欧洲、大洋洲约占1/3
临床胰岛细胞移植疗效是否成功，其关键在于胰岛分离的纯度活力、获得率这三项指标是否达到指定标准，并与其成正比关系国际上，一般临床应用指标标准为分离纯度达50%以上,活力75%以上，供受体比率为2:1。应用COBE2991细胞分离机及其新型配置和改进可使胰岛细胞分离的纯度达85%以上,比通常标准提高60%胰岛细胞活力达90%以上，比通常标准提高30%,供受体比率降至1:1,从而可大大提高胰岛细胞临床移植的成功率和远期疗效。
用改良型COBE-2991胰岛细胞分离机进行胰岛细胞分离纯化，提要:目的探讨预防性和治疗性给予果糖二磷酸钠镁对于链脲佐菌素损伤的胰岛B细胞有无堡作用。方法应用葡萄糖氧化酶法测定是深圳市威斯比生物科技发展有限公司已掌握的独有技术，即COBE-2991设备生产厂商，也承认此点，他们已授权深圳市威斯比生物科技发展有限公司在胰岛细胞分离纯化技术方面，作为中国大陆推广该机器的唯一商务代表和售后技术服务机构。您好telly4444，好像您是与厂家熟悉，胰岛细胞瘤能把他们的产品照片登上来吗？不好意思图片贴不上。请上如下网址就可看见图片了不好意思图片贴不上。请上如下网址就可看见图片了这完全就是COBE2991吗，国产指的是组装了还是就是代理？胰岛b细胞价格？您能告诉我们吗对,是COBE2991。不是国产的是进口的。我们是国内的唯一代理商。具体的价格如果您有需要的话可以直接和我们联系。我们还可以给您提供胰岛细胞分离纯化方面的技术服务。
深圳市威斯比生物科技发展有限公司
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网上主页：订货邮箱：技术服务邮箱：正着手人的胰岛分离搬张板凳先学学长长见识。马上就要做这个课题了，被老板催得紧，希望楼主们多多发表意见！我在上的Yield是不太明白在胰岛分离的实验中
SD大鼠和有什么区别吗？请指教谢谢有篇文章讨论了这个问题，的Yield是三种大鼠Lewiswistar,SD中最高的另外，的得率还要确认一下你是如何计算的，如果是取样品x倍数的话，一般会放大得率一倍以上其次，要看你对胰岛的评判标准如何，是否把碎胰岛无功能也计算在内。你可以把你的图片发上来吗？lsra您好，其他人想的与我不一样，的Yield是三种大鼠Lewiswistar,SD中最高的这片文章出处？SD大鼠是分的应该是最多，所以大家都选用SD大鼠，SD大鼠本身只有1000个胰岛细胞，分离过程损失很多，世界上目前分的最好，也只有700800个，我看您对胰岛分离有方法，看您的对的移植方法完全正确，对您的胰岛分离数目虽然怀疑，但您发表意见不是离谱很正确。我也很想看看您的胰岛照片。1型糖尿病胰岛细胞凋亡机制的研究进展- 维普资讯医学研究临床年月第卷第期如果照片无误您将会是中国第一。谢谢您的宝贵意见
对于我的实验数据的真实与准确我还是很有信心的我会尽快的发送照片给您的很希望与搞胰岛分离与移植的同行朋友们互相切磋学习，并提高
谢谢thyroid说的没错，的确有这篇文章，大家可以却看看。
另外，建议lsra将分离的胰岛/rat完整的数一篇，你用的方法的确有不小的误差。胰岛能分泌胰岛素与胰高血糖素等激素。人类的胰岛细胞按其染色和形态学特点，主要分为A细胞B细胞、D细胞及PP细胞。A细胞约占胰胰岛细胞的20%，分泌胰高血糖素数胰岛的方法有误，1000个一下的不应取20分子一，相当于损失或增多100200个胰岛细胞。
并且可以的话，请您把您的方法大概说一下，我们不需要详细，想知道您消化酶种类，胰岛D细胞,分泌生长抑素,呵呵回答：欢迎登录知识人会员名：密码：记住我的登录状态会员注册忘记密码新浪会员请直接登录消化时间，粉碎程度，以及剃度离心的选择。让大家看一下您是用哪里的方法。您好，很高兴看到您的protocle。很值得瞩目。
您的方法正是我想搞清楚的。谢谢。lsra的操作有点烦琐，洗的次数太多，这样胰岛也是损伤，我作分离的经验是消化是关键，要消化的恰到好处，其他的步骤也要注意，纯化的步骤只要梯度是对的，前几步作的都好，产量是有保证的。我最后是手拣胰岛，好的胰岛一个一个数出来，得率是400个/只SD大鼠你好！我也要做大鼠胰岛细胞分离的实验，正在准备中。我订试剂的时候订了10g双硫腙，上海产的，5g一瓶，我用不了那么多，你还要吗？我可以转让给你。我的信箱是号是459356903，你若有意，可与我联系。答单个细胞样的是不是包含A，B，D细胞的一个胰岛细胞？2一般文献上所说的胰岛细胞团是指包含A，B，D细胞的一个胰岛细胞吗？3而大团块是一个胰岛细胞团还是多个胰岛细胞团？4胰岛B细胞能看得出吗？5这样的大团块该如何计数，算几个细胞？
1此为已被消化过度而破坏了的胰岛仅剩外壳，已无存活的细胞。
2文献上所说的胰岛细胞团是指包含A，B，D细胞的一个胰岛，胰岛是组织的名称，由数十至数百个A，B，D及PP细胞结聚而成。
3大团块是多个胰岛，从图看你的消化结果不好，胰岛没有与腺泡外分泌完全分离分离的胰岛相互粘连。
4胰岛B细胞未经特殊染色是看不出。
5这样的大团块算3个胰岛，另外小于50um直径的不计数。胰岛细胞移植
您好，这里的细胞，很难看出是胰岛细胞，倒是象外分泌细胞。如果胰岛细胞没有与外分泌细胞分离？但是看图像不是分离后互相聚集起来的而是分离时就分离出这种成团的细胞，我们在胰岛细胞分离时有3个胰岛细胞未与外分泌分离却成团分离出来的情况吗？也就是说难道胰岛细胞互相之间离的这么近？大鼠生后发育期间胰岛D细胞的胰岛淀粉样多肽和生长抑素的表达解剖学报1999年第2期第0卷论著作者：郭双平石爱荣王先荣翟宇强黄岩单位：郭双平石爱荣王不是的。胰腺的病理切片告诉我们不是，要是这照片是分离后细胞成团后照出来的？那就不好说了。
下面贴胰岛细胞和外分泌细胞图片。
缩略图，点击图片链接看原图强烈同意lan_hf的经验：分离的经验是消化是关键，要消化的恰到好处。胰岛分离关键在消化，包括组织粉碎的程度、酶的种类及浓度、消化时间，需要操作者自己多次摸索才行，消化的好，一般都会得到好的纯化结果。
