胰岛B细胞的功能变化与各型糖尿病的发生发展、病理改变及病情转归均密切相关,故B细胞功能检查对于糖尿病的诊断鉴别诊断、判断病情和指导治疗具有重要意义。
对B细胞分泌功能的了解至今临床是通过测定外周静脉血中B细胞分泌诸激素浓度的改变来获得的。一次测定的意义有限,一般需作多次测定您好!口服葡萄糖耐量胰岛素释放试验OGTIRT简单实用,已广泛应用于临床,即作常规口服葡萄糖耐量试验OGTT的同时,平行测定血样中的胰岛素浓度RIA法作动态观察。以达到比较深入和准确的了解。如结合若干释放(刺激)或抑制试验又同时测定血糖浓度变化来分析结果,则更有价值。
胰岛B细胞分泌的激素至少有4种胰岛素、C肽和胰岛素原(类)属于同一基因表达的产物,胰淀素(amylin)属于另一基因。这些激素在血中的浓度很低均为水平。自Yalow和年)首先建立了胰岛素的放射免疫分析法,开创了能成批快速、适用于科研和临床的免疫测定方法。即利用在试管内的抗原与抗体反应原理,加上示踪物的方法来比较待测物与标准品对同一抗体的免疫反应性,口服葡萄糖胰岛素释放试验例句方法36例肝硬化患者与30例正常人进行口服葡萄糖耐量及胰岛素释放试验同时测定C肽,测定胰岛素敏感性。来达到测定许多血及其他生物液中的超微量生物活性物质的目的。Yalow称此类方法为观察微观世界的探针。在20世纪70年代已开展了C肽的RIA测定。当时的困难是C肽相对分子质量比较小(Mr为3020),用常规方法免疫动物(兔豚鼠等),胰岛素释放很难得到高滴度、高特异性及高亲和力的免疫血清(或称为抗血清)。Faber等(1977年)用C肽,牛血清白蛋白复合物免疫多只豚鼠。胰岛素释放实验筛选出一株高质量的C肽抗体(代号M 1230)。人胰岛素原与此抗体的交叉反应仅11,用此株抗血清作了许多关于胰岛B细胞分泌功能的研究。试餐后胰岛素分泌高峰后延23小时是2型糖尿病的特征。六C肽释放试验及胰岛素释放试验有何不同?C肽释放试验可作为指标来了解B细胞功能。C肽释放试验胰岛素释放试验20世纪80年代,随着对胰岛素原代谢的深入了解,人们开始重视胰岛素和C肽测定的特异性问题。盐敏感高血压者与胰岛素抵抗盐敏感性高血压患者口服葡萄糖耐量及同步胰岛素释放试验各时点血糖浓度及胰岛素浓度均明显高于盐不敏感者进一步分析显示%盐用传统方法免疫动物所获得的抗胰岛素或抗C肽的多克隆或单克隆抗体,一般均不能识别或不能完全识别胰岛素原(类),故用这些抗体测定胰岛素或C肽的测定值,口服葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验、型糖尿病和肝脏疾病合并糖尿病时葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验研究文档日志暂无日志信息都包含或部分包含胰岛素原(类),特别是对胰岛素的测定值影响较大,因为血中胰岛素的浓度比c肽低510倍。当时的测定值分别被称为免疫活性胰岛素,IRI)及免疫活性C肽IRC)。20世纪80年代,Lillv公司在用基因工程生产药用胰岛素的过程中,人胰岛素原是副产品。用酶解法可制备各种胰岛素原的中间代谢物。这些纯品是大量开展人胰岛素原免疫测定法的基本条件,也是鉴定IRI、IRC测定法的特异性(交叉反应)所必需的。在20世纪80年代后期,不少学者建立了相当特异性,基本上不包括胰岛素原(类)的真胰岛素(或称特异性胰岛素)RIA和免疫放射测定,IRMA)方法。20世纪80年代及90年代又出现了酶联免疫吸附法其原理与IRMA相似。
最近对胰岛素原(类)的测定报道愈益增多,因为发现其增高与2型糖尿病的发病有关。测定方法也有RIA、IRMA和ELISA3种。
胰淀素分泌测定的临床研究至今报道较少,也尚未普遍作为一种评价B细胞功能的方法,故未包括在本章讨论范围内。
1免疫活性胰岛素测定和口服葡萄糖耐量一胰岛素释放试验
口服葡萄糖耐量-胰岛素释放试验简单实用,已广泛应用于临床,即作常规口服葡萄糖耐量试验(OGTT)的同时,平行测定血样中的IRI浓度(RIA法)。WHO建议的方法是在空腹及口服75g葡萄糖后l、2及3小时各采血1次共4次。但不同学者根据不同的目的也有测定5次(WHO法加试餐后30分钟)或3次(0、1及2小时)或两次(01小时或0、2小时)者。国内外也有报道以100g淀粉(2两馒头)作试餐者。
一般认为,正常非肥胖成人的空腹IRI在,试餐后的变化幅度比血糖大(Yalow等1960年)。可见当时测定的正常人胰岛素餐后峰值均值约胰岛素)。
国内IRI的成人正常值已有较多报道(表3-4)。其OGT-IRT值有一定差别,胰岛素释放试验价格与各家所用IRI试剂盒不同有一定关系。由表3-4可见A、B两厂家的试剂盒,空腹IRI值比用C厂家试剂盒的测值高。根据近年来的多数报道,非超重正常成人的空腹IRI大多数在,75g葡萄糖(或馒头100g)餐后、30分钟或60分钟的峰值在极少数人。在试餐后180分钟,大多数降到稍高于空腹时的水平。用100g馒头试餐时,该型包括需胰岛素治疗和不需胰岛素治疗两类。特点为空腹高胰岛素血症OGTT试餐后,胰岛素释放延迟高峰后移,但总释放量不低,约12%病人呈低反应或延迟反应,同步胰岛素释放试验各点均值稍高于75g葡萄糖餐者,但无统计学差异。胰岛B细胞功能研究协作组的报道显示男、女之间无差异,年龄50岁以上与1449岁组无差异。但不足14岁的青少年组各点IRI比1449岁组者高(PKPl或K1100换而言之,可能IRI为I+PII+PI,即PI在IRI中所占比例与PI在血中的真实含量可能相同,但也可能被缩小或被夸大,并且这种交叉反应的变化与血中IRI的浓度有关。IRC也有类似情况,但因C肽在血中的浓度大,故PI对IRC测定的影响相对较IRI者为校IRI的测定值常不能真实反映血中胰岛素的浓度,故影响测定值的实验室之间及不同试剂盒之间的可比性,并可能得出高胰岛素或高C肽浓度的错误结论。尤其是在某些胰岛素原增高的情况下更是如此。
20世纪70年代人们即开始探索分别测定胰岛素(I)和胰岛素原(类)的方法。这种方法称为特异性胰岛素或真胰岛素测定,其测定值基本排除了胰岛素原(类)的干扰。早年采用层折法或吸附法处理血样预先将胰岛素原(类)与胰岛素分开(Melani,1970年)再进行测定的方法,因繁琐耗时,难以大批量检测血样已放淘汰。目前所用的方法常见的有3种:仍然用RIA法,但大量筛选多克隆或单克隆抗体,经特异性鉴定PI的交叉反应率